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内地工厂化循环水养虾中绿弧菌的生物防控技术-五大步骤+设施设备系统的完善预防+固态培养工艺生产的高密度粪肠球菌加持

2024/6/20 17:48:09   文章来源:强微生物科技   浏览次数:1691
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一、工厂化循环水养虾生物防控绿弧菌的主角——固态培养的粪肠球菌(王者归来)

       1、TCBS检测培养基上的绿弧菌是常见死虾掉苗原因:
       相信广大的内地工厂化循环水养虾,都曾经遇到过顽固性的绿弧菌的困扰,甚至无法做到彻底的消灭它们,总是断断续续-不断感染,同时伴随着恼人的死虾掉苗,本文就系统的讲解一下,绿弧菌的生物防控原理和技术细节;
       2、TCBS上的黄色菌落则一般不要紧,或者可能是粪肠球菌(乳酸菌的一种):
       在讲解之前,顺带说一下,如果TCBS检测培养基上长出来的是黄色菌落,一般没有什么大问题,甚至长出来的有可能只是粪肠球菌而已(粪肠球菌是乳酸菌的一种),我们用了市场上常见的几个菌株(如固态培养的粪肠球菌、液态培养的粪肠球菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌等),故意接种于TCBS培养基上,在30度恒温培养箱中培养24小时整,拿出来观察后发现:只有固态培养的粪肠球菌,会长出非常茂盛的黄色菌落,而其他三个菌种,平板上要么是一片空白,要么是非常弱势的菌落和星星点点的点缀;
        所以在TCBS检测培养基上,长出黄色菌落,要么是黄弧菌(但这是一种条件致病菌),在对虾体质良好正常的情况下,不会发病;要么就是粪肠球菌(要以在24小时内在TCBS上长出黄菌落),如果要鉴别的话,可以用显微镜1000倍下观察,粪肠球菌(乳酸菌的一种)是球形的,一般成双成对,而黄弧菌是杆状或弧形的(当然,即便是杆状或弧形的,也未必是黄弧菌,因为自然界杆菌和弧形菌还有很多),但真正准确的鉴别,还是要做PCR试验(或DAN鉴定);

       如下面的图所示:

 

   3、相似的生理习性是粪肠球菌竞争性抑制绿弧菌的强有力原理
        可见,乳酸菌中的粪肠球菌,和绿弧菌一样,都可以在TCBS培养基上非常茂盛的长出密密麻麻的菌落出来,要知道,TCBS培养基是特意为弧菌量身定做的,只适合于革兰氏阴性细菌的弧菌生长繁殖,并不适合于属于革兰氏阳性细菌的粪肠球菌(乳酸菌)生长,TCBS培养基中添加了胆盐和较高的氯化钠(食盐)等成分,来特意抬高绿弧菌的生存概率,并打压其他常见细菌的生存度,否则怎么叫弧菌专用培养基呢?
        但即便是这样,我们固态培养的粪肠球菌,照样可以象绿弧菌黄弧菌一样,在TCBS培养基上茂盛的生长,并密密麻麻满屏繁殖,相反,其他的细菌,甚至同样是粪肠球菌(只是采用传统的液态培养+喷雾干燥或冷冻干燥工艺生产的粪肠球菌),用传统液态培养工艺生产的粪肠球菌,也无法在TCBS培养基上24小时生长出来,另外,传闻非常强势的枯草芽孢杆菌也在TCBS培养基上培养24小时,生长也只是零星的弱小菌落,可见,只有固态培养+气流干燥工艺生产的粪肠球菌,才具备和弧菌一争高下的能力;  
      它们具有同样的生理习性,同样的生长营养需求,越是相同的习性,竞争性越强,甚至可以这样说,作为绿弧菌黄弧菌,最强竞争是同一种细菌之间的竞争,因为它们需要同样的营养源和生存环境,当他们高速繁殖非常嗨之时,也就是他们面临灭亡之前的回光返照,因为它们正在迅速消耗掉自身赖以生存的资源和环境。
   4、固态培养的粪肠球菌(王者归来)是绿弧菌-黄弧菌最强有力的生态竞争者
       如果只有营养和环境需求相似来判断,它们是强烈的竞争关系,则未免不妥,我们还需要根据菌株生长速度和抵抗恶劣环境的强势与弱势进行判断,很显然,我们知道的是:粪肠球菌是一株非常强势的菌株;非常适合用作为水产养殖中,特别是南美白对虾和其他易感弧菌的水产品养殖的,作为抑制弧菌的菌株优选;
       关于繁殖速度,有一个名词叫理想繁殖速度(或理想代繁速度),就是在该细菌最理想的环境下(最适的营养,最适的水温,最适的PH,最适的渗透压)下繁殖一代,1个分裂成2个时,所花费的时间;
       据查各方面的资料,不同弧菌的理想代繁速度大概是27-38分钟,而粪肠球菌的理想代繁速度是20分钟,显然是比弧菌繁殖更快;不仅如此,粪肠球菌更耐受高渗透压环境,粪肠球菌是从动物后肠是提取出来的,生活在动物粪便中的菌株,耐受后肠超高的氨氮和渗透压环境,并与大肠杆菌共存的数亿年,相伴进化而来,大肠杆菌基本上是星球上繁殖最快的细菌之一,大肠杆菌的理想代繁速度是19分钟一代,粪肠球菌作为与之相伴的细菌,如果没有两把刷子,是不可能成大肠杆菌共存亿年;
      弧菌虽然是嗜盐菌(即耐受高渗透压环境),但粪肠球菌在这方面,与之不相上下,粪肠球菌是市场上的菌株中,更适合在高盐度环境中正常生长繁殖的菌株,这也决定了,它是弧菌妥妥的竞争关系。
      另外,在耐受恶劣环境中,粪肠球菌更有优势,例如PH的适宜生长范围,粪肠球菌就更为广泛,可耐受3-10.5的PH范围,可耐受1.0%的胆盐浓度,以及高达6.5%NaCl高盐度,但弧菌只适应PH6.5-9.0范围,它是嗜盐度,可耐受高达10%的盐度,但实际应用中,并没有这么高的盐度,我们内地工厂化循环水养虾标苗期的盐度最高,但也只有1.5%的盐度(即千分之15)
     5、在内地工厂化循环水养虾池水,感染了绿弧菌之后,使用固态培养的粪肠球菌,三天即可解决问题
     水体中的绿弧菌,2-3天就可消失不见,完全被固态粪肠球菌抑制住,至于体内和肠道的绿弧菌,下面会介绍用内服拌料丁酸梭菌+粪肠球菌+大蒜浆来解决;

     6、固态培养+气流干燥法生产粪肠球菌(乳酸菌一种)工艺设备介绍
      固态培养工艺+气流烘干生产粪肠球菌,生产成本高,但产品活力强,耐保存耐运输,耐高温贮存,夏天3个月损失率不大于10%。因为它是连同培养基一起气流烘干作为产品的工艺,产品生产含量只有500亿/克左右(出厂会统一稀释到100-200-300亿含量)产品外观粗糙,色泽不一(这是固态培养工艺所决定的);
      而传统的成熟的液态培养工艺+冷冻干燥或喷雾干燥,却可以生产出8000亿/克含量的细腻,同样的投资,生产效率是固态培养法的5倍以上,但缺点是:所生产的产品不耐热,不耐保存,不耐运输,夏天3个月内若常温保存,损失率高达80%以上;
      虽然固态培养法生产的粪肠球菌,有诸多的产品优势,但由于生产效率不高,生产成本又高,所以鲜有公司会去费神费力生产固态培养的粪肠球菌;


固态培养设备是这样的

二、工厂化循环水养虾遇到绿弧菌时的处理方法(五步法)

    1、第一步就是池水泼洒粪肠球菌(王者归来)
     使用“强微王者归来”用量为2克/立方米 + 白糖或红糖3-5克/立方米(红糖或白糖的作用是为了 让王者归来中的粪肠球菌,得到适度繁殖,但不要用多了),以养殖池水体积为计算标准;另外需要指出的是:绿弧菌(副溶血弧菌)并不能利用白糖双糖;
    使用方法:用池水浸泡以上产品和糖,浸泡1-3小时后,全池泼洒于养殖池中;
    一天使用一次,基本上三天可以保证池水中,检测不到绿弧菌;

    2、第二步是拌料:用大蒜头打成的浆+丁酸梭菌+粪肠球菌拌料
     从市场上购买大蒜头,用打浆机打成浆,按饲料量的2%添加量,然后“畅丁-5”的用量按说明书提高5倍,即用量为“畅丁-5”用10克/公斤饲料;即每一公斤饲料中,添加大蒜头浆20克,添加“畅丁-5”10克;
     注意:“畅丁-5”中含有丁酸梭菌和粪肠球菌;
     使用方法:将20克的大蒜头浆 + “畅丁-5”10克,临时混合在一起,再添加50毫升的清水,搅拌均匀,立即洒到饲料中,再人工或机器搅拌均匀即可,即可放到自动投料机中喂料,或人工喂料;

    3、第三步是:注意及时收集死虾
     其实这一步是必须及时及时及时做到的,利用吸虾壳的装置,将死虾吸上来,安排工人每1-2小时就去巡视和吸死虾一次,人工收集死虾,必须及时,因为感染了绿弧菌的死虾,如果不能及时收上来,就会被其他活虾吃掉,从而感染面会扩大,会在三天内迅速传染到全池所有虾体内;
     细致的虾农,做好死虾收集记录,记录下每一天收集上来的死虾有多少条,以作为后期投料量判断的依据。当然,还必须乘以2,因为人工收集上来的死虾只是你看到的,还有很多没有看到的死虾,已经被其他虾吃掉了,所以,数量上要乘以2,但我这么说,并不代表真实的死虾是乘以2的,这只是保守估计,实际死虾肯定不会到乘以2,要更少;

    4、每四步是:注意排污和清除系统的死角
     这一点很重要,绿弧菌能不能通过以上措施,得到彻底的清除,取决于您的养虾系统中,是否还存在死角(就是那种过一天就发黑发臭的地方),如果这些死角不清除,那么你永远也别想彻底消灭绿弧菌,因为这些死角,是绿弧菌的得以不断繁殖的温床,就算你用市场上最好的来弧菌产品,加大20倍剂量来用,也别想彻底消灭绿弧菌。这种事,我们曾经亲自经历过。主要注意以下几点:
     第一点:生化池的回流管不要布局成U字型:我们曾经就经历过这种情况,当时我们的从生化池回流到养殖池的回流管是先往下走地面,到虾池后,再分支管往上,再回流到虾池,成一个U字型布局,那么这U字型管道布局的最低部,就藏污纳垢,里面非常的发黑发臭;有一次发现绿弧菌之后,死虾不断增加,我们购买了近1000元人民币的市场上最好的治弧菌的药物数种,从说明书用量,到20倍剂量,都无济于事;
     第二点:不要用太粗的管道:我们也有过经历,我们之前的管道是315mm的主管,从虾池出来的主管,和从生化池回流到虾池的主管,都是315mm的,里面的水流速度非常缓慢,后面在改造时发现,里面底部藏污纳垢,非常黑臭;改造之前发生绿弧菌时,我们也检测过这些315mm主管内部的水中的弧菌,管道中的水中的绿弧菌检测浓度,远远大于虾池中的浓度。
     春节时,我们把从虾池到微滤机池的315管道,改成4根单独从4个虾池出来的管,管径也改成100mm的PVC管,并在微滤机池前面做了一个缓冲混合池,就是一拖四的养成池系统,变成4根100mmPVC管单独从每1个虾池出来,先进入缓冲混合池中混合后,再进微滤机过滤。如下图;
      然后我们把从生化池回流到虾池的回流管,改成了200mm的悬空安装的管路(不再是先下后上的U字型布局),如下图;
      改造完毕之后,马上养虾,又遇到了绿弧菌,这一次,就按本文的方案进行处理,没有对外购买治弧菌的药物,而是采用宜春强微的生态产品处理,如王者归来泼洒虾池,拌料“畅丁-5”和大蒜等,三天内就把体内体外的绿弧菌治好了,并且,再也没有复发反弹;

从虾池排污出来的4根100mm排污管

从虾池出来的4根100mm排污管先进入缓冲混合池中

从生化池回流到虾池的200mmPVC主管是悬空安装的

     第三点:市场上的鱼马桶其实也存在死角:这是我们发现的,而且很难消除,天天都是产生发黑发臭的东西,也是一大死角;解决的方法是:设备改造,我有四川的网友,采用的方法是:在鱼马桶底部打上高标水泥浆,将鱼马桶底部做成大斜角的斜面,就解决了这个问题;
     如果您正在养虾过程中,还没有来得及改造,那没有别的办法,就是天天拔管1-2次,肉眼看到有发黑发臭的污水出来几秒后,就插回拔管即可,排污完毕。这个操作在改造之前,必须天天操作;

     5、第五步是:有紫外灯的开紫外灯几天,每天开3小时:但不建议使用臭氧,我们的经历是,使用臭氧后,死虾会增多,这种现象非常明显,即便把臭氧剂量放小很多倍,也是一开臭氧就发现死虾增多,不开还更好;
      紫外灯要配置到位,一个200立方米的一拖四养成池系统,至少配置5千瓦以上的紫外灯功率。

三、下面放两个视频

        第一个视频就是介绍如何通过以上5步来处理绿弧菌的;

6步法处理绿弧菌开始出现绿弧菌
加了1步是临时用水老鼠清洗管道

       第二个视频是介绍为什么说,只有固态培养的粪肠球菌产品,才是处理绿弧菌的王者归来

为什么说只有固态培养的粪肠球菌,才是处理绿弧菌的王者归来

      


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