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(种猪篇)*猪的人工授精技术*

2009/12/1 19:45:28   文章来源:转载   浏览次数:30446
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1、采精前的准备
     采精一般在采精室进行。当公猪被牵引或驱赶到采精室时,能引起公猪的性兴奋。采精室应平坦,开阔,干净,少噪音,光线充足。采精人员最好固定,以免产生不良刺激而导致采精失败,要尽可能使公猪建立良好的条件反射。设立假母猪供公猪爬跨采精,假母猪可用钢材、木材制作,高60~70厘米、宽30~40厘米、长60~70厘米,假母猪台上可包一张加工过的猪皮。
 
(1)公猪的调教 
     对于初次采用假母猪采精的公猪必须进行调教,方法是:
     ① 在假母猪台后驱涂抹发情母猪的阴道黏液或尿液,也可用公猪的尿液或唾液,引起公猪的性欲而爬跨假母猪;
     ② 在假母猪旁边放一头发情母猪,引起公猪的性欲和爬跨后,不让交配而把公猪拉下,爬上去,拉下来,反复多次,待公猪性欲冲动至高峰时,迅速牵走或用木板隔开母猪,引诱公猪直接爬跨假母猪采精;
     ③ 将待调教的公猪拴系在假母猪附近,让其目睹另一头已调教好的公猪爬跨假母猪,然后诱使其爬跨。总之,调教要有耐心,反复训练,切不可操之过急,忌强迫、抽打、恐吓。
 
(2)物品准备
      应准备好带过滤纱布的棕色集精(瓶、杯、袋),消毒手套,保温杯,0.1%高锰酸钾溶液,以及进行镜检、稀释所需的各种物品,若采用重复使用的器材,在每次使用前应彻底冲洗消毒,然后放入高温干燥箱内消毒,亦可蒸煮消毒。
 
(3)采精人员的准备
      采精人员的指甲必须剪短磨光,充分洗涤消毒,以消毒毛巾擦干,然后用75%的酒精消毒,待酒精挥发后即可进行操作。
 
2、采精方法
      徒手采精法是目前采集公猪精液使用最广泛的一种方法。采精员戴上消毒手套,蹲在假母猪左侧,等公猪爬上后,用0.1%的高锰酸钾溶液将公猪包皮附近洗净消毒,当公猪阴茎伸出时,导入空拳掌心内,让其转动片刻,用手指由轻至紧,握紧阴茎龟头不让其转动,待阴茎充分勃起时,顺势向前牵引,手指有弹性、有节奏调节压力,公猪即可射精。
      另一只手持带有过滤纱布集精瓶收集精液,公猪第一次射精完成,按原姿势稍等不动,即可进行第二或第三、四次射精,直至完全射完为止。
      采集的精液应迅速放入保温杯中,由于猪精子对低温十分敏感,特别是当新鲜精液在短时间内剧烈降温至10℃以下,精子将产生不可逆的损伤,这种损伤称为冷休克。因此在冬季采精时应注意精液的保温,以避免精子受到冷休克的打击不利于保存。
      集精瓶应该经过严格消毒、干燥,最好为棕色,以减少光线直接照射精液而使精子受损。
      由于公猪射精时总精子数不受爬跨时间、次数的影响,因此,没有必要在采精前让公猪反复爬跨母猪或假母猪提高其性兴奋程度。
 
3、精液品质的检查
      采得精液后,要迅速置于30℃左右的恒温水浴中,以防止温度突然下降对精子造成低温打击,要求动作迅速,取样具有代表性,评定结果力求准确,操作过程中不应使精液品质受到危害,对精液品质标准要进行综合全面的分析。确定精子是否可以用于保存或输精。
 
(1)感观检查
      精液的感观评定非常重要,主要包括气味、颜色和体积。
     ① 判定精液是否有异味,有异味的精液不能用于输精,应及时淘汰;
     ② 公猪精液正常的颜色应当是灰白色或乳白色;
     ③ 异物观察:如精液中出现异物、毛、血等,则说明精液已被污染,这样的精液也不能用于输精或保存,有血往往是由于在采精时伤及公猪的生殖器官或生殖器官疾患而引起的,而出现尿液则说明采精时温度不适当;
    ④ 公猪的平均射精量为250毫升,范围为150~500毫升,发现射精量过少,必须查明原因,只有都符合正常要求的精液才能作进一步的检查和处理。
 
(2)镜检
      其主要内容包括精子活力、密度及精子形态的检查。
 
      ① 精子活力的测定
      精子的活力是指原精液在37℃下呈直线运动的精子占全部精子总数的百分率。测定方法是将一滴原精液滴在一张加热的显微镜载玻片上,显微镜工作台的温度应保存在37℃,(冬天显微镜工作台必须加温保温处理,保持37度左右),一般地,鲜精活率应在80%以上,当活率低于40%时精液不可再用于输精。
      由于精子的活力受环境条件的影响很大,为了得到客观、准确的结果,在评定时应注意如下方面:检查活力时应保存在恒温条件下进行;不要让阳光直接照射到精液样品上;远离易挥发的化学物质或消毒剂;要多看几个视野,把各个视野的评定分数加在一起,求出平均数。
 
     ② 密度的测定
     最常用的方法是白血球计数器。计算板法虽然比较准确,但费工费时,在生产条件下,不便采精后都做检查,现在已经有了自动化程度很高的专门仪器,将分光光度计、电脑处理机、数字显示或打印机匹配,只要将一滴精液加入分光光度计中,就可以很快得到所需的精于密度和精子总数。
     正常精液精子密度平均2.5亿(1亿~3亿之间),从镜检看精子密度高的精液往往呈云雾状。
 
     ③ 精子畸形检查
       正常精子形态象蝌蚪,形态异常的活力不高,为了保证受胎率必须检查精子的形态。精子畸形一般分四类:
       头部异常,头部巨大、瘦小、细长、圆形、轮廓不明显、皱缩、缺损、双头等;
       颈部异常,颈部膨大、纤细、曲折、不全、双颈等;
       尾部异常,弯曲、短小、缺损、双尾等;顶体异常,顶体不完全、异形。
 
       其中顶体完整率对受精影响最大,目前有条件的,都使用相差显微镜直接检查顶体的完整率。
 
4、精液的稀释和保存
       精液经检查合格后,尚需经过稀释、分装、保存和运输等过程,最后用于输精。精液稀释是在精液里加一些配制好的、适宜于精子存活的并保持精子受精能力的溶液。早期的人工授精,精液稀释的目的是单纯为了增加精液的容量,以便为更多的母猪输精,从而提高公畜的配种效能。现代的人工授精,精液稀释不仅要增加精液的容量,还能使精液短期甚至较长期地保存起来、继续使用,便于长途运输,从而大大提高优秀公猪繁殖率。因为一头公猪每次射精所获得的精子数远远大于授精所要求的精子数,大约多15~30倍。
 
(1) 稀释液的成分
      一般精液稀释液包括有一种或多种保护剂,尽管目前采用的精液稀释液配方多种多样,但就其化学组成上来看主要有以下一些成分: 
      营养剂:减少精子自身能量消耗,以便延长精子寿命,一般为糖类,如葡萄糖、果糖。 
      稀释剂;主要扩大精液容量。因此这类物质的剂量,必须与精液具有相同的渗透压,一般采用等渗的氯化钠、葡萄糖、果、蔗糖以及某些盐类溶液。 
      保护剂:为降低精液中的电解质浓度起缓冲作用,一般用于缓冲的物质有柠檬酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾等。 
      抗生素:以阻止细菌生长,常用抗生素有青霉素、链霉素、庆大霉素、林肯霉素等
 
(2) 稀释液的配制
       猪精液常温保存常用的稀释液种类很多如EDTA、GuelPh、BTS、Zorpva、Reading等。
      可以根据保存期的长短要求选择配方,配制时各种成分称量务必要准确,如果不能保证称量准确,最好采用配制好的商品稀释液粉。
      由于稀释液在溶解后1小时内其pH出现明显的波动,到约1小时后才达到平衡。pH的变化可能对精子造成不利。所以,配制后在1小时后使用为宜。
 
(3) 精液的稀释和稀释倍数
      在公猪的一次射精的精液中,包含的精子数远远多于一头母猪受精所需的数量。因而,可将精液稀释多倍,供多头母猪输精用,如果已测得精子密度,那么可按比例稀释,要求稀释后每毫升稀释精液含1亿个精子为原则进行稀释。如果密度没有测定,稀释倍数一般以2~4倍为宜。
       加入精液稀释液应在精液采出后尽快进行,因为新鲜精液不经稀释不利于精子存活,特别是当室温较低时,精子容易受到低温刺激,甚至出现温度性休克。所以在采出精液后,应注意保温,使集精瓶的温度在采精后维持在30℃左右,精液与稀释液的温度必须调整到一致,一般是将精液与稀释液置于同一温度(30℃)中,温度相同后即可进行稀释。
      方法是将一定量的稀释液沿杯壁缓慢倒入精液杯中,轻轻摇匀,如果稀释倍数大,先进行低倍稀释,防止精子所处的环境的突然改变,造成稀释打击。 
 
(4) 精液的保存
       稀释后即进行保存。猪目前大都采用常温液态保存,最佳保存温度为16~18℃,为保持这一温度,夏天应将精液保存于常温冰箱中,冬天则应保存于恒温箱中。虽然,常温保存可将精液保存7天,但在实践中,保存精液不应超过3天。在精液存放阶段,精子多沉淀在容器的底部,因此,通常每天要将容器倒置1~2次,以保证精子均匀地分布在稀释液中。
      精液常温保存的原理是利用酸抑制精子的代谢活动,而不是通过温度达到这一目的。因为在中性和弱酸性的环境中,精子代谢正常,当降低到一定的酸度后,精子的活动受到抑制,在一定PH范围内,这种抑制是可逆的,当pH恢复到7左右时,精子可以复苏,如PH继续降低,超出此范围,则出现不可逆抑制。研究结果表明,不同的酸类对精子发生抑制的pH区是不相同的。一般认为,有机酸较无机酸为好,容易产生抑制,而且可逆性抑制区较宽阔。
       总之,在精液稀释和保存过程中,以温度、PH值、渗透压等变化最小为好。
 
      精液运输时应该注意事项: 
      (1) 运输的精液应附有详细的说明书,标明站名、公猪的品种和编号、采精日期、精液剂量、稀释倍数、精子活力和密度等。 
      (2) 运输过程中应防止剧烈的震荡和温度变化过大。 
      (3)低温保存的精液,应加冰维持低温运输;常温保存的精液,也应维持较固定的温度。
 
6、输精技术
      ① 输精器械:
      猪的输精器由一个医用玻璃注射器和一条软质橡胶导管组成,注射器容量为30~50ml,前端连接一条长50cm的橡胶导管,导管末端呈圆锥形。输精前输精器必须严格消毒,并用1%氯化钠溶液或稀释液冲洗2次。
      ② 输精量:
      猪的一次输精量:鲜精液为30~40ml,冻精为20~30ml。
      ③ 输精前的准备
      首先对发情母猪进行发情状况检查,确定为适时输精时间后,清洗母猪外阴及肛门;其次检查所用精液活力,合格者才用于输精。若为低温保存的精液,升温至35℃左右,活力不低于0.6级;冻精升温解冻后,活力不低于0.3级。输精人员清洗消毒双手、擦干,穿上工作服准备操作。
      ④ 输精操作
      母猪可以不加保定。精液吸入输精器,在橡胶导管上图一薄层灭菌凡士林,用以润滑导管。输精员站于母猪后侧,左手将母猪尾捉住,输精员右手持输精器,用拇指和食指握住输精器橡胶导管,将其插入母猪阴道,再向上向前稍稍旋转缓缓推进,通过子宫颈达到子宫体,25~30cm深。在插入输精导管过程中如遇母猪左右摆动或向前走动,不必抽出输精管,可叫助手按压母猪的腰荐部;输精员也可用手握住输精器跟随母猪走动的方向移动。当确定输精管已插入子宫体时,轻轻推动输精器活塞,将精液缓缓猪入子宫内。
 
      细颈塑料瓶低精量输精操作:细颈塑料软瓶低精量输精是我国推广应用的一项猪的人工授精技术;这项技术是将盛贮精液的塑料软瓶直接接上输精导管输精,一次输精量为10ml。操作方法:输精时,让母猪自然站立,将塑料软瓶的接头棱削去,手握软瓶颈,将其套在输精导管上,软瓶位置高于母猪的阴户10~15cm,然后缓缓压入精液。当精液输至一半时,取下塑料软瓶,竖立,吸进空气后再套在输精导管上继续输精。输精完毕,取下塑料软瓶,再次套上输精导管,挤压塑料软瓶几次,以免输精导管内残留精液。然后缓慢抽出输精导管,用手按压母猪腰荐部。输精完毕,立即清洗输精器械,晾干下次备用。
 
7、人工受精的优越性
       人工授精是指用人工方法,将公猪精液采出后,经过严格的检查处理,再用器械将精液输入母猪生殖器官的一种配种方法。它的优越性在于:可以充分利用公猪,减少公猪饲养量,降低养猪生产成本。例如,一头种公猪在合理利用的前提下,能担负20~30头母猪的配种任务,如果实行人工授精,公猪的一次采精量可为5~15头母猪配种,用其精液全年可担负200~400头母猪的配种。在猪的选育区,用人工授精的方法,可以充分利用鉴定的优秀公猪个体,充分发挥其遗传影响,加快品种选育的进度。可以提高母猪情期受胎率和产仔数。因为人工授精所用精液都经过严格检查,保证质量,配种可以掌握实施。
       可以防止传染病传播,克服公猪体格差异造成的交配困难。因为只有健康的公猪才能用作人工授精,阻断了传染源。同时,人工授精公母猪并不接触,减少了疾病传播的机会,又克服了本交的困难。
       通过精液的运输,使配种不受地区的限制,尤其在边远山区,可以送精上门,为农户母猪配种。方便群众。

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